回复realtiger发表于：2009/2/24 16:43:05悬赏金额：
33积分 状态：
已解决
急需用磷酸氢二钾与磷酸二氢钾配制磷酸盐缓冲液(pH7.8)，
取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
这种方法配出来的是多少mol/L的缓冲液？pH是7.8吗，有没有别的方法？详细点的。
另外，用下面方法
磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。
乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
钠盐和钾盐有什么区别呢，用来做土壤样品提取液进液质？
方法步骤如下：
称取10 g试样，加入10.0 mL乙腈：0.2mol/L磷酸缓冲溶液（pH 7.8）（2：8，v/v）(以下简称提取液)，旋涡1 min，提取5 min，离心5 min。提取步骤重复3次，每次提取液均为10 mL。合并3次提取并离心后的上清液与50 mL烧杯中，加约1 mL 83％磷酸调节pH值至2.5±0.1
净化：SPE柱先用5mL甲醇浸泡活化30min，淋洗，再用5mL提取液（用85%磷酸调节pH值至2.5）淋洗。上样，控制在1mL/min，样品过完后，抽真空10～15min。洗脱，最后用3mL乙腈：pH7.8磷酸缓冲液(9：1,v/v）洗脱，N2吹干，用乙腈定容至1mL，待测。
这个步骤有什么问题吗，最后上液质质有和不利影响吗？谢谢了先
不同的缓冲盐的配制可以自己在网上根据自己的需要查找，有很多关于这方面的，就不多说了。前处理中提取主要是根据所提取药物的性质来选择提取液的，也不多说。
单看你最后的净化，感觉你的这个萃取柱很不常规，可能活化、淋洗有所不同，因为你活化时间很长，过完样品之后在要抽那么长时间的真空。最后吹干后，不能完全用乙腈定容吧，一定要使用你
液相条件中的初始流动相比例才是正确的。这个洗脱液可以根据具体药物性质选择的，就最好不好加入这种非挥发性的盐了。
1,浓度你用里面阴离子总量来算就可以。
2，配置缓冲液，你也可以先确定阳离子的物质的量，然后用磷酸调到想要的pH
3，不挥发的盐会腐蚀污染你的离子源。
原文由 realtiger 发表:
急需用磷酸氢二钾与磷酸二氢钾配制磷酸盐缓冲液(pH7.8)，
取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
这种方法配出来的是多少mol/L的缓冲液？pH是7.8吗，有没有别的方法？详细点的。
另外，用下面方法
磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。
乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
钠盐和钾盐有什么区别呢，用来做土壤样品提取液进液质？
方法步骤如下：
称取10 g试样，加入10.0 mL乙腈：0.2mol/L磷酸缓冲溶液（pH 7.8）（2：8，v/v）(以下简称提取液)，旋涡1 min，提取5 min，离心5 min。提取步骤重复3次，每次提取液均为10 mL。合并3次提取并离心后的上清液与50 mL烧杯中，加约1 mL 83％磷酸调节pH值至2.5±0.1
净化：SPE柱先用5mL甲醇浸泡活化30min，淋洗，再用5mL提取液（用85%磷酸调节pH值至2.5）淋洗。上样，控制在1mL/min，样品过完后，抽真空10～15min。洗脱，最后用3mL乙腈：pH7.8磷酸缓冲液(9：1,v/v）洗脱，N2吹干，用乙腈定容至1mL，待测。
这个步骤有什么问题吗，最后上液质质有和不利影响吗？谢谢了先 |
bocai 回复于：2009/2/26 22:18:07
洗脱液换成别的不就ok了，再说了，你用磷酸盐溶液洗脱下来之后里面那么多水吹干多麻烦啊！即使吹干了再用乙腈定容的话，还有什么意义，吹掉的乙腈和水是完全可以进质谱的，也可能是楼主的信息不全我理解不透.不过还是建议换别的溶剂洗脱，这个方法最直接。
磷酸盐是非挥发性盐，不能进质谱的。
最后一步不用缓冲液回收率差很多吗？
从你的条件看，样品应该偏酸性，你可以看看Waters的固相萃取方面的手册，好像有专门针对不同性质化合物的SPE小柱和处理方法。
zhufangwei 回复于：2009/2/24 23:09:13
您现在的位置：
