食品添加剂的高效
液相色谱分析
一、目的要求
1、了解高效
液相色谱仪和紫外检测器(或二极管阵列检测器DAD)的使用范围、原理和使用方法。
2、掌握高效
液相色谱含量测定方法和方法学的考察。
二、基本原理
苯甲酸、山梨酸、糖精钠能在紫外可见光区有吸收,因此选择高效
液相色谱(配UV或DAD检测器)对上述三种化合物进行分离,定性定量测定。
三、仪器与试剂
仪器:高效
液相色谱仪(配UV或DAD检测器);C18反相柱;容量瓶。
试剂:甲醇(色谱纯),乙酸铵、超纯水,滤膜。苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准品。
四、试验步骤
1. 色谱条件:色谱柱,ODS反相柱(4.6×150 mm i.d.);
流动相:0.02M一酸铵+甲醇=90:10,
检测波长,230 nm;
流速,1 mL/min;柱温,25˚C。
2. 标准溶液的配制
准确称取一定量的苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准品,置于25ml容量瓶中,用流动相溶解,定容,配制成标准溶液。
3. 样品的配制
准确称取一定量的食品样品 (精确至0.000l g 置于25 mL容量瓶中,用流动相稀释、定容,配制成样品。
五、方法学考察
1. 线性相关性测定
配制 6个不同浓度标准品溶液,分别进样分析,以浓度为纵坐标,峰面积为横坐标作图,检测方法的线性范围和相关性。
2. 方法的精密度
在要求的色谱条件下,对同一样品分别称取4个样进行定量分析,计算含量,变异系数以及标准偏差。
3. 方法的准确度
采用标准添加法,在已知含量的样品中滴加一定量标准溶液,在要求的色谱条件下进行测定,检测方法对苯甲酸、山梨酸、糖精钠的检测回收率。
六、结果与讨论