食品添加剂的高效液相色谱分析
  一、目的要求
1、了解高效液相色谱仪和紫外检测器（或二极管阵列检测器DAD)的使用范围、原理和使用方法。
2、掌握高效液相色谱含量测定方法和方法学的考察。   
二、基本原理
    苯甲酸、山梨酸、糖精钠能在紫外可见光区有吸收，因此选择高效液相色谱（配UV或DAD检测器）对上述三种化合物进行分离，定性定量测定。
    三、仪器与试剂
仪器：高效液相色谱仪（配UV或DAD检测器）；C18反相柱；容量瓶。
  试剂：甲醇（色谱纯），乙酸铵、超纯水，滤膜。苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准品。
四、试验步骤
1. 色谱条件：色谱柱，ODS反相柱（4.6×150 mm i.d.）；
流动相:0.02M一酸铵+甲醇=90：10，
检测波长，230 nm；
流速，1 mL/min；柱温，25˚C。
2. 标准溶液的配制
准确称取一定量的苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准品，置于25ml容量瓶中，用流动相溶解，定容，配制成标准溶液。
3. 样品的配制
准确称取一定量的食品样品 (精确至0.000l g 置于25 mL容量瓶中，用流动相稀释、定容，配制成样品。
五、方法学考察
1. 线性相关性测定
配制 6个不同浓度标准品溶液，分别进样分析，以浓度为纵坐标，峰面积为横坐标作图，检测方法的线性范围和相关性。
2. 方法的精密度
在要求的色谱条件下，对同一样品分别称取4个样进行定量分析，计算含量，变异系数以及标准偏差。
3. 方法的准确度
采用标准添加法，在已知含量的样品中滴加一定量标准溶液，在要求的色谱条件下进行测定，检测方法对苯甲酸、山梨酸、糖精钠的检测回收率。
六、结果与讨论