回复ada825发表于：2008/12/2 13:34:00悬赏金额：
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已解决
我测地塞米松的浓度，已经测了三次了，以前的时候峰都不错，6分左右出峰，这次又做的时候，进对照品每次的峰面积都不一样了，有时25，有时22，还有16的时候，而且峰面积小了之后，还有的针峰面积又回来了，峰面积小的时候我看样品瓶里的样品液面下降的少，像是没吸足体积，开始考虑是针堵了，但清洗还会出现这样的情况，过一天再跑，样品峰鼓肚了，就是前头有个小包，跟主峰在一起，以前从来没出现过这样的情况。冲了一天柱子后，再进样（进的都是对照品），前6针都挺好，后来又是鼓肚，峰面积也不稳。又考虑是预柱不行了，换了之后仍然是这种情况.能是慢慢出杂质了吗？把流动相比例调了一下，跟6分多的杂峰分开了，8分多样品出峰，但峰面积比以前小（而且以前出也没看到有杂峰啊）。且不稳定，有大有小。冲柱子时柱压比较稳，但进样时柱压就变化比较大。开始时138，后来有120多的时候，还有到150多的时候。它不是一直在变的，都是比较稳定一会儿，然后变。实在是搞不清楚是怎么回事了。大家帮忙分析分析。前几次做的时候都挺好的，真是百思不得其解。
我同意楼上的说法，方法是验证的话，应该是系统或色谱柱的原因，这样看来的话，你的压力曲线就是不稳的，你应该从你的仪器上找一下原因，比例阀、滤芯都有可能有问题，您的六通阀有问题吗？因为在您进样的时候六通阀的流路刚好有一个切换
这个问题我以前也碰到过几次，后来证实是进样阀有杂质污染或堵塞的问题，自动进样器的话应该是进样针脏或进样阀堵的问题，所以会每次进样多出个鼓包的杂峰出来，而且进样结束后，流动相经过被堵的进样阀时，压力会有较大的波动。不妨试试多洗洗针，反复大体积量进样甲醇和水，还可以不接柱子，用两通代替柱子，然后走大流速冲洗进样阀。不妨试试看！
原文由 ada825 发表:
我测地塞米松的浓度，已经测了三次了，以前的时候峰都不错，6分左右出峰，这次又做的时候，进对照品每次的峰面积都不一样了，有时25，有时22，还有16的时候，而且峰面积小了之后，还有的针峰面积又回来了，峰面积小的时候我看样品瓶里的样品液面下降的少，像是没吸足体积，开始考虑是针堵了，但清洗还会出现这样的情况，过一天再跑，样品峰鼓肚了，就是前头有个小包，跟主峰在一起，以前从来没出现过这样的情况。冲了一天柱子后，再进样（进的都是对照品），前6针都挺好，后来又是鼓肚，峰面积也不稳。又考虑是预柱不行了，换了之后仍然是这种情况.能是慢慢出杂质了吗？把流动相比例调了一下，跟6分多的杂峰分开了，8分多样品出峰，但峰面积比以前小（而且以前出也没看到有杂峰啊）。且不稳定，有大有小。冲柱子时柱压比较稳，但进样时柱压就变化比较大。开始时138，后来有120多的时候，还有到150多的时候。它不是一直在变的，都是比较稳定一会儿，然后变。实在是搞不清楚是怎么回事了。大家帮忙分析分析。前几次做的时候都挺好的，真是百思不得其解。 |
可能是你进样系统的六通阀漏或者阻塞造成。可以用异丙醇连续进样，清洗一下看看是否改善。
原文由 ada825 发表:
原文由 lipingxt 发表:
1）方法经过验证吗？是不是有极性小的东西，遗留在后面了
2）柱压不稳，进样和不进样柱压有变化，有可能是你的六通阀的问题
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方法前一阵我同事做的时候经过验证了，我完全跟他一样，而且我前几天做的时候都挺好的。
柱压冲的时候挺稳的，就是进样了之后不稳，进样的时候一下子就低了，然后再高。后来的柱压就是最开始高，有时候还会慢慢下来。 |
方法经过验证
应该是进样器的问题
nnsss 回复于：2008/12/3 11:46:52
原文由 ada825 发表:
40%乙腈水，后来一直有鼓包后，调整为35%乙腈水 |
考虑样品的稳定性,或者溶解条件,再就考虑柱子是否平衡好了
lipingxt 回复于：2008/12/3 15:42:51
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