回复dickwang2008发表于:2008/11/25 10:26:51悬赏金额:
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应用液质联用仪进行分析时,所接触的大多数化合物都是非极性或者极性较小的,这样它在柱子上的保留特性就比较好,样品处理起来也比较简单。但分析极性大的物质时,比如蛋白质和多肽类,在建立样品预处理和色谱方法时,就与分析非极性的化合物相差很大,那么我们应该注意哪些问题呢,各位有什么好的建议,可以建言一下。欢迎各位积极交流。
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原文由 dickwang2008 发表: 应用液质联用仪进行分析时,所接触的大多数化合物都是非极性或者极性较小的,这样它在柱子上的保留特性就比较好,样品处理起来也比较简单。但分析极性大的物质时,比如蛋白质和多肽类,在建立样品预处理和色谱方法时,就与分析非极性的化合物相差很大,那么我们应该注意哪些问题呢,各位有什么好的建议,可以建言一下。欢迎各位积极交流。
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一般也就在色谱柱上下功夫。其它的考虑的问题和其它化合物没什么两样。。
目前正在做的就是大极性的物质,用的是LC-MS/MS做的,最好用ESI离子源,色谱柱可以使用特殊处理的ODS填料的,而且最好是亲水性的柱子,可以承受大水相流动相,个人比较了普通c18,效果不好!
选择适当的色谱柱(反相柱或亲水色谱柱),调节好流动相的pH值。如LC的流动相条件与MS矛盾较大,可考虑柱后修饰。
用ph值也可以改变出峰时间。
TFA(三氟乙酸)-用于分析蛋白和多肽–它能抑制ESI+电离至少0.1%。–它将很大程度上抑制ESI-电离。tfa可以改变ph值来优化出峰时间