回复neuzhang发表于:2008/11/9 16:49:08悬赏金额:
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已解决
求细菌样品的制备方法.
注:本人接触电镜刚一个星期,新手,求高手分享细菌样品制样的方法和经验!
先谢了!
悬浮状细菌样品需要先离心清洗,沉降在有膜的盖玻片上,戊二醛、锇酸固定,梯度乙醇脱水,干燥处理再喷金观察。如果是培养的爬片,直接清洗固定脱水干燥处理,喷金后就可以观察了。处理过程中需要注意的是:样品一定要清洗干净,避免培养液覆盖在细菌表面影响观察效果,可以用生理盐水或者PBS清洗;可以选用Formar膜(制备相对复杂,但沉降效果较好),也可以用镀金膜的盖玻片(制备方便,沉降效果一般);沉降时间要适度,太短的话沉降的细菌较少,贴附也不紧密,时间太长的话细菌形态会受影响;再有就是在戊二醛固定过程中可以把盖玻片轻轻左右晃动几次,使之分布均匀,以避免沉降的细菌团聚在一起;在脱水干燥过程中应尽量避免脱水剂对盖玻片的直接冲击,可从周围贴壁加入脱水剂。