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共有 3 人回复了该问答蛋白质沉淀和水解蛋白质结合物的应用规则
 回复lishupinmong发表于:2008/10/20 19:53:22悬赏金额:20积分 状态:未解决
在前处理中,内脏组织大多杂质很多,需要沉淀蛋白质,沉淀后离心,提上清夜再萃取,但内源性物质中的待检物同时也会和蛋白质成结合状态,需要水解,再萃取。所以请问如果我先沉淀了蛋白,那么会不会把成结合状态的待检物一同沉淀,损失待检物。在运用中如何处理蛋白质杂质和蛋白质结合物的前处理问题?
 回复  1# lxdongzi2003  回复于:2008/10/21 10:36:19
原文由 lishupinmong 发表:
在前处理中,内脏组织大多杂质很多,需要沉淀蛋白质,沉淀后离心,提上清夜再萃取,但内源性物质中的待检物同时也会和蛋白质成结合状态,需要水解,再萃取。所以请问如果我先沉淀了蛋白,那么会不会把成结合状态的待检物一同沉淀,损失待检物。在运用中如何处理蛋白质杂质和蛋白质结合物的前处理问题?

如果你的待检物与蛋白质一起结合,那你要是直接先沉淀蛋白,肯定会把待检物沉淀掉的,造成回收率下降。
可以用破坏待检物与蛋白质形成结合物的试剂来减少待检物的沉淀损失;也可以直接萃取,再去除杂质。
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