回复03yx2发表于:2008/10/17 14:08:59悬赏金额:
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我们在利用一种色谱条件在做完一份样品之后,紧接着要做第二分样品,但是第二分样品和第一份样品所用的色谱条件是不一样的.如第一份用的是甲醇:水的梯度.第二分要使用的是乙腈:水的梯度.
而这中间时间比较紧的话.用什么过渡下才可以满足第二种样品所需的条件.
原文由 03yx2 发表: 我们在利用一种色谱条件在做完一份样品之后,紧接着要做第二分样品,但是第二分样品和第一份样品所用的色谱条件是不一样的.如第一份用的是甲醇:水的梯度.第二分要使用的是乙腈:水的梯度. 而这中间时间比较紧的话.用什么过渡下才可以满足第二种样品所需的条件. |
甲醇换乙腈不需要过度,排空管路前端的甲醇,也可以加快速度。如果无缓冲盐的体系过度到缓冲盐,那就看下起始比例,最好水的比例要大于后来上的缓冲盐的比例。缓冲盐过度到水也不需要过度。缓冲盐对缓冲盐,如果同一个体系,比如都是磷酸盐体系,注意下浓度,不至于析出就好。特别注意的是,不同体系的缓冲盐换的时候要注意,如果pH值相差较多,建议先用水过度一下,最好是换跟柱子。还有特殊的盐,庚烷磺酸钠什么的,过度时间会很长,还不如洗掉,样品明天再做。
如果没有缓冲盐就不需过渡了,我们一般是用纯乙腈冲洗柱子(中药比较常见)保证把有些成分冲洗出来!然后用流动相平衡柱子就可以了!
如果有缓冲盐,只好用水过渡一下,用%95的水相过渡,防止产生结晶!对流动相的平衡也能快点!
Y就所举例来说是不用过的,直接冲就行了,冲之前抽一下