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共有 25 人回复了该问答N2000工作站内标
 回复zc56264560发表于:2008/9/2 22:26:45悬赏金额:20积分 状态:已解决
看我操作步骤:
内标物质水杨酸甲酯(含量100%),
配制浓度为5.72mg/ml(已换算浓度)
标品龙脑对照(含量99.8%),
配制浓度为5.21mg/ml(已换算浓度),用上述内标液稀释。
一、首先进2针对照,获得标准谱图
二、打开离线--方法--积分(选内标法)------采用----组分表----打开标准谱图
三、操作见图

请问: 图中内标物量如何填?(1)
四、点击采用----点校正,进入界面--校正---点标准含量---输入见下图

请教:图中内标水杨酸含量(2),对照龙脑含量(3),样品重量(4),重复次数(5)都如何填?
五、点ok----点加入标样谱图----调另一标样谱图---点校正完毕--进入下界面如图:

        为什么出现(内标物没有曲线)

        为什么没出现校正因子?
请教大虾能回答上面的(1),(2),(3),(4),(5)

说明:标样谱图没修改积分参数,进2针不平行,见下2个标样图(图1、图2均为同一标品):
图1 (进标样第一针)          原图

            修改参数图

图2 (进标样第二针)          原图

            修改参数图


  2针很不平行,我做液相手工进都很平行的,再看工作站默认积分的峰很宽,什么问题?
cuiyuchong 回复于:2008/9/24 14:13:20
我这有用内标法分析异丙醇的N2000操作步聚,对你的应该适用。

(异丙醇含量测定:内标法)
1.用离线色谱工作站进行数据处理的步骤:
(1)双击桌面上“N2000离线工作站”图标。
(2)单击“谱图”。
(3)单击“打开”。
(4)双击“样品”。如果打开的是样品文件夹此步可省略。
(5)选择“标样谱图名称”,单击“确定”。或双击“标样谱图名称”。
(6)单击“NO”。
(7)单击“加载”。
(8)选择“ 异丙醇面积内标法”后单击“打开”。或双击“异丙醇面积内标法”。
(9)单击“组分表”。
(10)按标样谱图,修改乙醇和异丙醇的保留时间。单击“采用”。
(11)单击“校正”。
(12)单击“标准含量”。
(13)输入乙醇和异丙醇的准确含量。
(14)单击“OK”。
(15)单击“加入标样”。
(16)双击“样品”。如果打开的是样品文件夹此步可省略。
(17)选择“标样谱图名称”,单击“确定”。或双击“标样谱图名称”。
(18)单击“校正完毕”。如果没有“校正完毕”,则证明组分的保留时间不正确,要重新进行(9—18)。
(19)单击乙醇和异丙醇,会显示出其相应的曲线图。
(20)单击“输出”。
(21)选择“异丙醇面积内标法”,单击“保存”。或双击“异丙醇面积内标法”。
(22)单击“谱图”。
(23)单击“打开”。
(24)双击“样品”。如果打开的是样品文件夹此步可省略, 单击“NO”。
(25)选择“样品谱图名称”,单击“确定”。或双击“样品谱图名称”。
(26)单击“加载”。
(27)选择“ 异丙醇面积内标法”后单击“打开”。或双击“异丙醇面积内标法”。
(28)单击“积分方法”,输入“样品量”,单击“采用”。
(29)单击“组分表”,输入“内标物量”,单击“采用”。
(30)单击“输出”。
(31)选择“ 异丙醇面积内标法”后单击“保存”。或双击“异丙醇面积内标法”。
(32)单击“加载”。
(33)选择“ 异丙醇面积内标法”后单击“打开”。或双击“异丙醇面积内标法”。
(34)单击“预览”,如果未发现色谱峰与组分名称不符,可以记录实验数据。如果发现色谱峰与组分名称不符,则必需对组分表进行修正。
2.组分表的修正: 如果发现色谱峰与组分名称不符,则需对组分表进行修正。
(1)单击“组分表”。
(2)按照组分名称,输入正确的保留时间。
(3)单击“采用”。
(4)单击“输出”。
(5)选择“异丙醇面积内标法”,单击“保存”。或双击“异丙醇面积内标法”。
(6)单击“加载”。
即重复用离线色谱工作站进行数据处理的步骤:(32-34)。
直至得到正确的实验报告。
yangliuxiang 回复于:2008/9/8 16:00:42
原文由 zc56264560 发表:
那得到的校正曲线Y=ax中的a就是校正因子吧?

对的,Y=ax中的a就是校正因子,只要你的标准谱图中标样的峰面积符合要求,保留时间符合要求的话,做出来的方法就没有问题了,标准谱图的重现性越好结果越精确。但是我看你为了是峰面积平行而修改参数,这样的谱图不能拿来做标准谱图,你最好试着在进样,直到进到参数不变峰面积和保留时间都符合要求了,这样的谱图才能拿来做标准谱图。你在试试看吧,会有进步的,希望你能有所发现。
gzzdgx 回复于:2008/9/7 22:43:41
原文由 zc56264560 发表:
大哥,还有几个问题:
1、保存的校正方法*mtd,只是个模版,只供下次调用,再次新做用重新的步骤求新的f,对不?
2、校正因子在N2000说明书里显示的是操作完直接给显示出(校正因子f=*****),显示很明显,说明书里并没说Y=ax中的a就是校正因子,所以我纳闷,标准曲线里的a就是校正因子?软件计算的和手工公式计算的应该没差别吧?
3、再请教.校正因子有量的范围吗?同一标准浓度同次、和不同次做都一样吗?比如这次f=1.1,下次要f=2.3,可信吗?
4、看下下面对照平行2针:
说明:标样谱图没修改积分参数,进2针不平行,见下2个标样图(图1、图2均为同一浓度的标品进了2针):

1、校正方法*mtd文件内主要保存有组分表、积分参数、校正曲线、仪器条件等信息。一般来说,校正因子每天都会有所不同,建议每天都做校正曲线。
2、校正因子应该一样,不过计算时各数据的单位可能有所不同,不过不会影响软件最终的计算结果。
3、同一标准浓度的标样,每次进样所计算的校正因子应该也大致相同,不可能相差很大的,要不然重复性就存在问题了。
4、楼主的这四个图(实际是二针样品)我只能说你的进样技术太差了,或者是仪器的原因(包括分流的原因和进样针的原因)。对于同一个样品,两次进样相同体积的样品,峰面积的相对偏差至少要在5%,如果是用无存液的进样针,则进样五次左右峰面积的相对偏差要在0.2%左右。
xky0230699 回复于:2008/9/5 8:11:40
原文由 yangliuxiang 发表:
N2000面积内标法校正曲线的制作操作方法如下:
1.首先获得标准谱图(连系进样多次,并且RSD符合要求)
2.数据采集--关闭查看基线--方法--积分
3.面积--内标法--采用--组分表
4.谱图(打开标准谱图)--自动调节--全选
5.命名峰(填表:命名各组分名称,如果是内标法则要标明其中的内标峰“是”,内标物纯量要设为1或实际含量,将内标峰拖放到第一位)
6.采用--提示“提交成功”--校正
7.组分含量(输入各组分实际含量,内标组分的含量为“1”或实际含量,选择重复次数,即进样采集的次数
8.加入标样(一次打开连系进样获的的标准谱图文件)
9.校正完毕--得到各组分的校正曲线
10.保存此时建立的“面积内标法”到指定的文件夹

那样品重量怎么设?,既然是平行,为什么只看到一个点.
duliuhui 回复于:2008/9/4 15:11:54
原文由 yangliuxiang 发表:
N2000面积内标法校正曲线的制作操作方法如下:
1.首先获得标准谱图(连系进样多次,并且RSD符合要求)
2.数据采集--关闭查看基线--方法--积分
3.面积--内标法--采用--组分表
4.谱图(打开标准谱图)--自动调节--全选
5.命名峰(填表:命名各组分名称,如果是内标法则要标明其中的内标峰“是”,内标物纯量要设为1或实际含量,将内标峰拖放到第一位)
6.采用--提示“提交成功”--校正
7.组分含量(输入各组分实际含量,内标组分的含量为“1”或实际含量,选择重复次数,即进样采集的次数
8.加入标样(一次打开连系进样获的的标准谱图文件)
9.校正完毕--得到各组分的校正曲线
10.保存此时建立的“面积内标法”到指定的文件夹

这个基本差不多了。
内标法设置中第一个峰必须是内标。
 回复  1# zc56264560  回复于:2008/9/2 22:44:07
表中图1内标物量,纯度,表3内标含量,标品含量都怎摸填啊?,没单位
我杂填得到和图4、5一样结果(内标物没有校正曲线, 标品校正曲线和线性方程)
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