回复lixiaohui012发表于：2008/8/27 10:56:52悬赏金额：
20积分 状态：
已解决
最近在做土壤蛋白酶，可是做了几次提出来的待测液体在比色的时候总是茶色，不知道是为什么？ 我是按照关松萌的土壤酶及其研究法上的茚三酮比色法做的，不知道问题到底出在哪里，希望大家能给我指点迷津，方便的话可以给我发邮件，我的邮箱是 xiaoyu589@163.com 谢谢啦！
原文由 lixiaohui012 发表:
我做的提取液有颜色，用水浴加热后还是茶色。问题到底出在哪里啊？请各位帮忙啊！ |
你可以试一试用pH电极调一下溶液的pH值，调到显色的具体pH
请问一下，你们做蛋白酶的时候甘氨酸标准溶液稀释的是不是10倍？我稀释10倍沸水浴后怎么有的不变色啊？然后我稀释5倍，但是测出来的不成一天直线，真郁闷了，还有就是土样的大空白（就是不加土样的空白）怎么每次都比土样的高许多？那个小空白（就是有土样但是加水的空白）还可以，是不是哪里做错了，请教高手们帮我分析下哪里出错了,多谢了！~~~~~~~~~~~~
原文由 lixiaohui012 发表:
我说一下我操作的步骤，各位大侠们帮我找找问题到底出在哪里？
称取风干土4g，加1ml的甲苯15min后，再加入20ml的1%干酪素（干酪素是用PH
7.4的0.2M的磷酸盐缓冲液配制）在培养箱中30度下培养24h，培养结束后，再加入2ml 0.1N的硫酸和20%的硫酸钠溶液，再离心（6000转每分钟）15min，取上清液2ml，置于50ml的容量瓶中，加1ml茚三酮（2%的茚三酮，用丙酮配制），在沸水浴上水浴10min，将获的着色溶液用蒸馏水稀释至刻度。
我的问题现在就是水浴以后，溶液变为茶色，不知道是什么原因。茚三酮应该没有问题，因为标线可以做出来，麻烦各位帮我想想，到底问题出在哪里，你们都是怎么做的啊？ |
氨基酸在碱性溶液中能与茚三酮作用生成蓝紫色化合物，
可以考虑可能影响实验的步骤，
或者蛋白酶的含量太低了！增加土样量再测一测！！
原文由 lixiaohui012 发表:
多谢帮忙。但是应该不可能是茚三酮的问题，因为我标线做出来了啊。多谢 |
那可能是蛋白酶含量太低了。
jiaoliwei 回复于：2008/11/26 18:42:46
您现在的位置：
