回复ninghan21222发表于：2008/6/14 18:48:51悬赏金额：
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我今天用安捷伦1100做有机酸分析，柱子是kromasil C18，紫外215nm检测，流动相是0.01M KH2PO4，刚开始还正常，4种不同有机酸都能分离开，换了一瓶新配的流动相后就发现4种有机酸单标和混标保留时间都在1.7min左右，昨天也发生过这种情况，后来晚上先用5%甲醇1ml/min冲1h，100%甲醇0.1ml/min冲12h后今天用就正常了，请问大家这是什么原因呢？？
你用的纯水相么？一般的C18柱子在纯水相里长时间会导致C18链（因为疏水性）的倒伏，从而导致组分没有有效的保留，柱子不具备分离能力。经过有机相（甲醇）的活化（再生），C18链重新舒展开来，能与样品相互作用，根据相互作用的不同使不同组分在不同的时间流出，达到分离的目的。
建议：适当增加有机相的比例，以保持柱子的分离能力，工作结束后，用溶剂冲洗再浸泡过夜。
另外，215nm，甲醇应该有一定吸收了吧？能否增大波长？或者改用乙腈可减小流动相的吸收。
柱子发生塌陷，柱效为o，样品不能在色谱柱上得到保留。需要再生（如你晚上的冲洗）
有可能是样品有残留，使你分析变得不可依性，重新冲洗了柱子就好了，我觉得应该就是这个问题@！
duliuhui 回复于：2008/6/15 0:17:51
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