回复zoujian1978发表于：2007/11/19 23:07:00悬赏金额：
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已解决
大家好，最近使用agilent液相，有一个问题想请教一下，我现在所在实验室有两台agilent 1200 HPLC。配置为 自动进样器，binary pump, 柱温箱，DAD检测器。现在还没有配置在线脱气机。每台液相都配置了两根agilent COLUMN. 一根为agilent epilase 4.6 *150 mm, 5um 的RP-18 HPLC column， 另一根则为zorbax SB 2.1* 50 mm, 1.8 um 的RP-18窄径快速分析柱。两台液相均为新仪器，使用时间不超过100小时，HPLC 柱也是新的HPLC column.
现在的问题如下：当使用4.6 * 150 mm 的HPLC column 时，一切正常 （流动相B为乙腈，A为水。比例为A/B = 20/80，均经过超声预处理10分钟，流动相流速为1.0 ml/min）。但是使用窄径柱时 （流速0.2-0.3 ml /min），基线上会出现很大的锯齿状噪音，噪音形状类似正弦波，在254 nm 下高达80-100 au, 使得正常的分析无法进行，出现的频度为一分钟1-2次。使用过程中柱压一直保持稳定与正常。
开始怀疑氘灯出现故障，但是换下hplc column, 仅以二通管连接，以1.5 ml/min的流速冲洗2 min 后，锯齿状噪音很快消失。因此可初步排除DAD检测器的问题。
当换上4.6 *150 mm的HPLC柱后，以低流速 （0.2-0.5 ml/min）冲洗时，锯齿噪音又开始出现，但提高流速置至1.5 ml/min时，噪音又很快消失。当流速降低至正常的1ml/min 甚至更低时，噪音不再出现。由于没有在线
脱气机，怀疑是流动相混合时产生的气泡，所以将流动相B调整为90 % 乙腈，流动相A，B均预先超声脱气。结果使用窄径柱时，问题依旧发生。此时我怀疑噪音是因为有气泡滞留在DAD检测器中，由于流速较低无法冲出，
大家认为有可能吗? 有使用过agilent zorbax 窄径柱的朋友遇到过类似的问题吗？如果是，有什么办法解决吗？或者有什么其它的原因？希望有高手给予指点。谢谢！
这个问题我以前也遇到过，规律的波动，成锯齿形，整体看起来就像梳子，后来在检测池后增加背压就解决了
原因应该就是在柱后突然的压降引起检测池产生气泡
sscwxb 回复于：2007/11/25 21:31:00
检测器出口是必须有背压管的，这样流通池才不会有气泡。流通池的耐压至少也在1-2个兆帕以上。
其实要从根源上解决问题，还是装脱气机。增加柱后压对监测器没好处，它不是赖高压的
为什么要在检测器后连上一根Peek管呢？难道是为了增加压力？那样灯管能承受那么大得压力嘛？请说明
原文由 zoujian1978 发表:
大家好，最近使用agilent液相，有一个问题想请教一下，我现在所在实验室有两台agilent 1200 HPLC。配置为 自动进样器，binary pump, 柱温箱，DAD检测器。现在还没有配置在线脱气机。每台液相都配置了两根agilent COLUMN. 一根为agilent epilase 4.6 *150 mm, 5um 的RP-18 HPLC column， 另一根则为zorbax SB 2.1* 50 mm, 1.8 um 的RP-18窄径快速分析柱。两台液相均为新仪器，使用时间不超过100小时，HPLC 柱也是新的HPLC column.
现在的问题如下：当使用4.6 * 150 mm 的HPLC column 时，一切正常 （流动相B为乙腈，A为水。比例为A/B = 20/80，均经过超声预处理10分钟，流动相流速为1.0 ml/min）。但是使用窄径柱时 （流速0.2-0.3 ml /min），基线上会出现很大的锯齿状噪音，噪音形状类似正弦波，在254 nm 下高达80-100 au, 使得正常的分析无法进行，出现的频度为一分钟1-2次。使用过程中柱压一直保持稳定与正常。
开始怀疑氘灯出现故障，但是换下hplc column, 仅以二通管连接，以1.5 ml/min的流速冲洗2 min 后，锯齿状噪音很快消失。因此可初步排除DAD检测器的问题。
当换上4.6 *150 mm的HPLC柱后，以低流速 （0.2-0.5 ml/min）冲洗时，锯齿噪音又开始出现，但提高流速置至1.5 ml/min时，噪音又很快消失。当流速降低至正常的1ml/min 甚至更低时，噪音不再出现。由于没有在线
脱气机，怀疑是流动相混合时产生的气泡，所以将流动相B调整为90 % 乙腈，流动相A，B均预先超声脱气。结果使用窄径柱时，问题依旧发生。此时我怀疑噪音是因为有气泡滞留在DAD检测器中，由于流速较低无法冲出，
大家认为有可能吗? 有使用过agilent zorbax 窄径柱的朋友遇到过类似的问题吗？如果是，有什么办法解决吗？或者有什么其它的原因？希望有高手给予指点。谢谢！
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建议用100%乙腈，冲洗窄径柱，20ml左右，如果还有，做个空白，看看三维是否有杂质。
smileangel1980 回复于：2007/11/28 9:54:00
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